[生物---选修3：现代生物科技专题]（共1小题，满分0分）
请个别同学回答以下关于基因工程和胚胎工程的相关问题：
（1）基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性．利用基因工程等技术培育转基因生物时，基因工程的四步骤如下：
第一步：目的基因的获取．获取方法有 （写出两种即可）．
第二步：基因表达载体的构建．该步骤常用的工具酶是 ．完整的重组载体应具备 种特殊DNA片段．
第三步：将目的基因导人受体细胞．如受体细胞为动物的 ，则常用的方法是显微注射法；如受体细胞为微生物细胞，则用 处理细胞，使其处于感受态，然后在一定温度下重组表达载体与缓冲液混合完成转化．
第四步： ．
（2）胚胎工程主要是对哺乳动物的胚胎进行某种人为的工程技术操作，然后让它继续发育，获得人们所需要的成体动物的新技术．
①体外受精：对精子进行获能处理的方法有 ．获能的精子与成熟的卵子需在 中完成受精作用．
②早起胚胎的发育：受精卵不断增殖的过程，细胞分化最先出现在 期．
③胚胎移植：适合移植的胚胎是 ．
知识点：生物
（1）从基因文库中提取，利用PCR技术扩增，人工合成 限制性核酸内切酶和DNA连接酶 4 受精卵 钙离子 目的基因的检测与鉴定
（2）①培养法和化学诱导法 获能溶液或受精溶液 ②囊胚 ③桑椹胚或囊胚
【考点】基因工程的原理及技术；胚胎移植．
【专题】正推法；基因工程；胚胎工程．
【分析】基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因﹣﹣DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA﹣﹣分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质﹣﹣抗原﹣抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．
【解答】解：（1）基因工程四部曲的第一步是获取目的基因，目的基因获取的方法有：从基因文库中提取、利用PCR技术扩增、人工合成法．
第二步是构建基因表达载体，需要用到的工具酶有限制酶和DNA连接酶．基因表达载体应该包括目的基因、启动子、终止子、标记基因．
第三步是将目的基因导人受体细胞．将目的基因导入动物细胞最常用的方法是显微注射技术，此方法的受体细胞多是受精卵．将目的基因导入微生物细胞，常用Ca2+处理细胞，使其成为感受态细胞，然后在一定温度下重组表达载体与缓冲液混合完成转化．
第四步是目的基因的检测和表达．
（2）①对啮齿动物、兔、猪等的精子用培养法（放入人工配制的获能液中）获能；对牛、羊等精子用化学法（放在肝素或钙离子载体溶液中）获能．获能的精子和培养成熟的卵细胞在获能溶液或专用的受精溶液中完成受精过程
②受精卵不断增殖的过程中，囊胚期开始出现细胞分化．
③受精后，应将受精卵移入发育培养液中继续培养到桑椹胚或囊胚阶段，再进行胚胎移植．
【点评】本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的操作工具及具体的操作步骤，掌握各步骤中的相关细节，能结合题干信息准确答题，属于考纲识记和理解层次的考查．