(16分)嫁接是我国古代劳动人民早已使用的一项农业生产技术,目前也用于植物体内物质转运的基础研究。研究者将具有正常叶形的番茄(X)作为接穗,嫁接到叶形呈鼠耳形的番茄(M)砧木上,结果见图1.
图1
图2
(1)上述嫁接体能够成活,是因为嫁接部位的细胞在恢复分裂、形成 组织后,经 形成上下连通的输导组织。
(2)研究者对X和M植株的相关基因进行了分析,结果见图2。由图可知,M植株的P基因发生了类似于染色体结构变异中的 变异,部分P基因片段与L基因发生融合,形成PL基因(PL)。以P-L为模板可转录出 ,在 上翻译出蛋白质,M植株鼠耳叶形的出现可能与此有关。
(3)嫁接体正常叶形的接穗上长出了鼠耳形的新叶。为探明其原因,研究者进行了相关检测,结果见下表。
实验材料
检测对象
M植株的叶
X植株的叶
接穗新生叶
P-L mRNA
有
无
有
P-L DNA
有
无
无
①检测P-L mRNA需要先提取总RNA,再以mRNA为模板 出cDNA,然后用PCR技术扩增目的片段。
②检测P-L DNA需要提取基因组DNA,然后用PCR技术对图2中 (选填序号)位点之间的片段扩增。
a. Ⅰ~Ⅱ b. Ⅱ~Ⅲ c. Ⅱ~Ⅳ d. Ⅲ~Ⅳ
(4)综合上述实验,可以推测嫁接体中P-L基因的mRNA 。
知识点:生物
(1)愈伤 细胞分化
(2)重复 mRNA 核糖体
(4)从砧木被运输到接穗新生叶中,发挥作用,影响新生叶的形态
(1)嫁接之后,嫁接部位的细胞属于已经分化的细胞,需要经过脱分化形成愈伤组织,愈伤组织通过再分化才能形成上下连通的输导组织,从而使接穗成活下来。
(2)比较图2中的上下两幅图可知,M植株的DNA上比X植株的DNA上多了一个片段P,由此可以判断属于染色体变异中的重复,P-L基因转录可得到mRNA,蛋白质合成在核糖体上进行。
(3)Ⅰ~Ⅱ片段和Ⅱ~Ⅲ的位点之间仅仅包含P基因片段,而Ⅲ~Ⅳ的位点之间仅仅包含L基因片段,Ⅱ~Ⅳ片段的位点之间包含了P基因和L基因片段,因此检测到融合后的P-L基因,只能选择Ⅱ~Ⅳ位点之间的片段扩增。
(4)观察表格可知M植株同时含有P-LDNA,X植株叶均不含相关物质,接穗新生叶含有P-LmRNA但不含P-LDNA,所以它的mRNA是在M植株中转录形成的,经嫁接部位运输到接穗的新生叶翻译出相关蛋白质从而使接穗上出现了鼠耳形的新叶。
考点:基因表达,变异,植物组织培养,PCR技术