【生物--选修3现代生物科技专题】（除特殊标注外每空2分，共15分）
人组织纤溶酶原激活物（htPA）是一种重要的药用蛋白，可在转htPA基因母羊的羊乳中获得．流程如下：
（1）为获取更多的卵（母）细胞，要对供体母羊注射 ，使其超数排卵．采集的精子需要经过 处理，才具备受精能力．
（2）htPA基因与质粒用同种限制酶切割后，通过 连接，以构建重组表达载体．将重组表达载体导入受精卵常用的方法是 ．检测目的基因是否已插入受体细胞DNA，可采用 技术．
（3）该生物工程中，利用 和胚胎移植技术可获得多个转htPA基因个体，这体现了早期胚胎细胞的 ．
（4）若在转htPA基因母羊的羊乳中检测到 ，说明目的基因成功表达．
知识点：胚胎工程
（1）促性腺激素 获能
（2）DNA连接酶 显微注射法 DNA分子杂交
（3）胚胎分割 全能性
（4）htPA
【考点】胚胎移植．
【分析】DNA重组技术至少需要三种工具：限制性核酸内切酶（限制酶）、DNA连接酶、运载体．
目的基因分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因﹣﹣DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA﹣﹣分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质﹣﹣抗原﹣抗体杂交技术．
【解答】解：（1）对供体母羊注射促性腺激素可促使其超数排卵．采集的精子需要经过获能处理才具备受精能力．
（2）htPA基因与载体需要用同种限制性核酸内切酶（或同种限制酶）切割，形成相同的黏性末端，然后再通过DNA连接酶连接，以构建重组表达载体．将目的导入动物细胞最有效的方法是显微注射法．检测目的基因是否已插入受体细胞DNA，可采用DNA分子杂交技术．
（3）利用胚胎分割和胚胎移植技术可获得多个转基因个体，这体现了早期胚胎细胞的全能性．
（4））若在转htPA基因母羊的羊乳中检测到htPA（或人组织纤溶酶原激活物），说明目的基因成功表达．